LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA REAKSI UJI PROTEIN

I. Nomor Percobaan       : II

II. Judul Perobaan         : Reaksi Uji Potein

III.Tujuan Percobaan : Untuk menguji kandungan yang terdapat di dalam protein

IV. Landasan Teori      :

         Protein, yang namanya berarti “pertama” atau “utama” merupakan makromolekul yang paling berlimpah didalam sel dan menyusun lebih dari setengah  berat kering pada hampir semua organisme. Asam amino merupakan unit struktur protein. Struktur protein ini terdiri dari polipeptida yang mempunyai rantai yang amat panjang, tersusun atas banyak unit asam amino.

Protein adalah instrumen yang mengekspresikan informasi genetik. Seperti juga terdapat ribuan gen di dalam inti sel, masing-masing mencirikan satu sifat nyata dari organisme, di dalam sel terdapat ribuan jenis protein yang berbeda, masing-masing membawa fungsi spesifik yang ditentukan oleh gen yang sesuai. Protein, karenanya bukan hanya makromolekul yang berlimpah, tetapi juga amat bervariasi fungsinya.

Semua protein di dalam semua makhluk, tanpa memandang fungsi dan aktivitas biologinya, dibangun oleh susunan dasar yang sama, yaitu 20 asam amino baku, yang molekulnya sendiri tidak mempunyai aktivitas biologi. Secara cukup sederhana protein berbeda satu sama lain karena masing-masing mempunyai deret unit asam amino sendiri-sendiri. Asam amino merupakan abjad struktur protein, karena molekul-molekul ini dapat disusun dalam jumlah deret yang hampir tidak terbatas, untuk membuat berbagai protein dalam jumlah yang hampir tidak terbatas.

Fungsi Biologi Protein

Ø  Enzim

• Protein yang paling bervariasi dan mempunyai kekhususan tinggi adalah protein yang mempunyai aktivitas katalisa, yakni enzim. Hampir semua reaksi kimia biomolekul organik di dalam sel dikatalisa oleh enzim. Lebih dari 2000 jenis enzim, masing-masing dapat mengkatalisa reaksi kimia yang berbeda, telah ditemukan di dalam berbagai bentuk kehidupan.

Ø  Protein Transport

• Protein transpor di dalam plasma darah mengikat dan membawa molekul atau ion spesifik dari satu organ ke organ lain Disini oksigen dilepaskan untuk melangsungkan oksidasi nutrien yang menghasilkan energi. Plasma darah mengandung lipoprotein, yang membawa lipid dari hati ke organ yang lain. Protein transpor lain terdapat di dalam membran sel dan menyesuaikan strukturnya untuk mengikat dan membawa glukosa, asam amino, dan nutrien lain membran menuju ke dalam sel.

Ø  Protein Nutrien dan Penyimpan

• Biji berbagai tumbuhan menyimpan protein nutrien yang dibutuhkan untuk pertumbuhan embrio tanaman. Terutama, contoh yang telah dikenal adalah protein biji dari gandum, jagung, dan beras. Ovalbumin protein utama putih telur, dan kasein protein utama susu merupakan contoh lain dari protein nutrien Ferritin jaringan hewan merupakan protein penyimpan besi.

Ø  Protein Kontraktil atau Motil

• Beberapa protein memberikan kemampuan kepada sel dan organisme untuk berkontraksi, mengubah bentuk, atau bergerak. Aktin dan miosin adalah protein filamen yang berfungsi di dalam sistem kontraktil otot kerangka dan juga di dalam banyak sel bukan otot. Contoh lain adalah tubulin, protein pembentuk mikrotubul. Mikrotubul merupakan komponen penting dari flagella dan silia yang dapat menggerakkan sel.

Ø  Protein Struktural

• Banyak protein yang berperan sebagai filamen, kabel, atau lembaran penyanggah untuk memberikan struktur biologi kekuatan atau proteksi. Komponen utama dari urat dan tulang rawan adalah protein serabut kolagen, yang mempunyai daya tenggang yang amat tinggi.

Ø  Protein Pertahanan

• Banyak protein mempertahankan organisme dalam melawan serangan oleh spesies lain atau melindungi organisme tersebut dari luka. Immunoglobulin atau anti-bodi pada vertebrata adalah protein khusus yang dibuat oleh limposit yang dapat mengenali dan mengendapkan atau menetralkan serangan bakteri, virus, atau protein asing dari spesies lain. Fibrinogen dan trombin, merupakan protein penggumpal darah yang menjaga kehilangan darah jika sistem pembuluh terluka. Bisa ular, toksin bakteri, dan protein tumbuhan beracun, seperti risin, juga berfungsi di dalam pertahanan tubuh.

Ø  Protein Pengatur

• Beberapa protein membantu aktivitas seluler. Diantara jenis ini terdapat sejumlah hormon seperti insulin, yang mengatur metabolisme gula dan kekurangannya menyebabkan penyakit diabetes. Hormon pertumbuhan dari pituari dan hormon paratiroid, yang mengatur transport Ca2⁺ dan fosfat. Protein pengatur lain, yang  disebut repressor mengatur biosintesa enzim oleh sel bakteri.

Ø  Protein lain

• Terdapat banyak protein yang fungsinya agak eksotik dan tidak mudah diklasifikasikan. Monelin, suatu protein tanaman dari afrika yang mempunyai rasa yang amat manis.

o   Protein dapat dibagi menjadi dua golongan utama berdasarkan bentuk dan sifat-sifat fisik tertentu; protein globular dan protein serabut. Pada protein globular rantai atau rantai-rantai polipeptida berlipat rapat-rapat menjadi bentuk globular atau bulat yang padat. Protein globular biasanya larut di dalam sistem larutan  (air) dan segera berdifusi ; hampir semua mempunyai fungsi gerak atau dinamik. Hampir semua enzim merupakan protein globular, seperti protein transpor pada darah, anti-bodi, dan protein penyimpan nutrien. Protein serabut bersifat tidak larut di dalam air, merupakan molekul serabut panjang, dengan rantai polipeptida yang memanjang pada satu sumbu, dan tidak berlipat menjadi bentuk globular. Hampir semua protein serabut memberikan peranan struktural atau pelindung. Protein serabut yang khas adalah α-keratin pada rambut dan wol, fibroin dari sutera dan kolagen dari urat.

Golongan-Golongan Asam Amino

Struktur ke-20 asam amino dibagi menjadi 4 golongan, yaitu: (1) golongan dengan gugus R nonpolar atau hidrofobik, (2) golongan dengan gugus R polar, tetapi tidak bermuatan, (3) golongan dengan gugus R bermuatan negatif, (4) golongan dengan gugus R bermuatan positif.

Delapan Asam Amino Mempunyai Gugus Nonpolar

            Gugus R  di dalam golongan ini merupakan hidrokarbon. Lima asam amino dengan gugus R alifatik (alanin, valin, leusin, isoleusin, dan prolin), dua dengan lingkaran aromatik (fenilalanin dan triptofan), dan satu yang mengandung sulfur (metionin).

Golongan Asam Amino Mempunyai Gugus Polar Tidak Bermuatan

            Gugus R dari asam amino polar lebih larut dalam air, atau lebih hidrofilik, dibandingkan dengan asam amino nonpolar, karena golongan ini mengandung gugus fungsionil yang membentuk ikatan hidrogen dengan air. Golongan ini meliputi glisin, serin, treonin, sistein, tirosin, asparagin, dan glutamin.

Golongan Asam Amino yang Mempunyai Gugus R yang Bermuatan Negatif (Asam)

            Golongan asam amino ini mengandung gugus R yang bermuatan total negatif pada pH 7,0. Asam amino ini meliputi asam aspartat dan asam glutamat, yang masing-masing memiliki tambahan gugus karboksil.

Golongan Asam Amino yang Mempunyai Gugus R Bermuatan Positif (Basa)

            Golongan asam amino ini mempunyai gugus R dengan muatan total positif pada pH 7,0. Asam amino ini meliputi lisin, arginin, dan histidin.

V. ALAT DAN BAHAN

      Alat :

-     Beker Gelas

-         Pipet tetes

-         Pengaduk kaca

-         Labu ukur

-         Bunsen

-         Gelas ukur

-         Tabung reaksi

-         Rak tabung reaksi

      Bahan   :        

-     Larutan NaOH

-         Larutan Protein

-         Larutan CuSO₄ 0,01 M

-         Larutan HgCl₂ 0,2 M

-         Larutan Timbal asetat 0,2 M

-         Larutan (NH₄)₂SO₄

-         Reagen Millon

-         Reagen untuk uji biuret

-         Larutan asam asetat 1 M

-         Aquadest

-         Larutan albumin

-         Bufer asetat pH 4,7 (1 M)

-         Larutan HCl 0,1 M

-         Larutan NaOH 0,1 M

-         Larutan BaCl₂

-         Serbuk albumin telur

-         Fuxion Mixture (3 bagian natrium karbonat anhidris dengan 2 bagian kalium nitrat )

VI. Prosedur Percobaan

A.  Uji Biuret

Tambahkan 1 ml NaOH 2,5 N ke dalam 3 ml larutan protein dan aduk. Tambahkan setetes CuSO₄ 0,01 M. Aduk, jika tidak timbul warna, tambahkan lagi setetes atau 2 tetes CuSO₄.

B.   Pengendapan dengan logam

Ke dalam 3 ml larutan protein tambahkan 5 tetes HgCl₂ 0,2 M. Ulangi percobaan dengan menggunakan Pb asetat 0,2 M.

C.   Pengendapan dengan Garam

Jenuhkan 10 ml larutan protein dengan ammonium sulfat. Untuk pekerjaan ini dilakukan pertama tambahkan jumlah sedikit dari garam tersebut, aduk hingga melarut. Tambahkan lagi sedikit ammonium sulfat dan aduk lagi. Kontinu sehingga sedikit garam tertinggal tidak terlarut. Apabila larutan jenuh kemudian disaring. Uji kelarutan endapan di dalam air. Uji endapan dengan reagen millon dan filtrat dengan uji biuret.

D.  Uji Koagulasi

Tambahkan 2 tetes HOAc 1 M ke dalam 5 ml larutan protein. Letakkan tabung dalam air mendidih selama 5 menit. Ambil endapan dengan batang pengaduk. Uji kelarutan endapan di dalam air. Uji endapan dengan reagen millon.

E.     Pengendapan dengan Alkohol

Tabung	1	2	3
Larutan Albumin HCl 0,1 M NaOH 0,1 M Bufer asetat, pH 4,7 Etil Alkohol 95 %	5 ml 1 ml - - 6 ml	5 ml - 1 ml - 6 ml	5 ml - - 1 ml 6 ml

Tabung-tabung mana yang menunjukkan protein yang tidak larut.Apakah kelarutan albumin dalam air pada titik isoelektriknya ?

F.      Denaturasi Protein

Tabung	1	2	3
Larutan albumin Buffet Asetat pH 4,7 (1 M) HCl 0,1 M NaOh 0,1 M	9 ml - 1 ml -	9 ml - - 1 ml	9 ml 1 ml - -

Tempatkan ketiga tabung dalam air mendidih selama 15 menit dan dinginkan pada temperature kamar. Dalam tabung mana yang kelihatan mengendap. Untuk tabung-tabung (1) dan (2) tambahkan 10 ml buffer asetat pH 4,7. tulis hasilnya.

G.  Uji Sulfur dalam Protein

Campur 0,5 gram serbuk albumin dengan dua kali berat dari fusion mixture, panaskan dalam cawan porselin sampai tak berwarna. Dinginkan dan dilarutkan dalam air panas. Saring jika perlu. Asamkan filtrat dengan HCl. Panaskan hingga mendidih dan tambahkan beberapa tetes larutan BaCl₂.

VII. Hasil Pengamatan

1. Uji Biuret

v  Putih telur  + larutan NaOH                 larutan bening + CuSO₄ (biru muda)                 terdapat 2 lapisan yaitu lapisan atas : ungu dan lapisan bawah : bening

v  Kuning telur + NaOH                 kuning + CuSO₄           terdapat 2 lapisan yaitu lapisan atas : ungu dan lapisan bawah : kuning dan ada endapan kuning

v  Albumin + NaOH   larutan bening + CuSO₄ (biru muda)      larutan bewarna ungu bening.

v  Tirosin + NaOH                 larutan bening + CuSO₄ (biru muda)     

       Larutan biru bening

2. Pengendapan dengan Logam

v  Kuning telur + HgCl₂                       larutan kuning muda dan ada endapan putih

v  Putih telur + HgCl₂                      larutan berwarna kuning dan terdapat endapan putih

v  Tirosin  + HgCl₂                larutan tetap bening tanpa ada perubahan

v  Albumin  + HgCl₂                  larutan berwarna putih susu dan lama kelamaan terbentuk endapan putih

v  Kuning telur + PbOAc      ada 2 lapisan yaitu lapisan atas berwarna kuning muda dan ada endapan putih dan lebih pekat dari yang lapisan bawah

v  Putih telur + PbOAc                  larutan putih keruh dan ada endapan putih

v  Tirosin + PbOAc                  larutan tetap bening tanpa ada perubahan

v  Albumin + PbOAc                    larutan berwarna putih dan lama kelamaan terbentuk endapan putih

3. Pengendapan dengan Garam

v  Endapan albumin (kristal putih) + reagen biuret (biru)        larutan berwarna biru muda dan ada gelatin putih

v  Endapan albumin (kristal putih) + reagen millon (putih)           larutan berwarna putih keruh dan ada endapan merah bata

v  Endapan albumin (kristal putih) + air          larutan bening

v  Filter albumin (putih keruh) + reagen biuret (biru)                     larutan berwarna biru muda dan ada gelatin putih

v  Filter albumin (putih keruh) + reagen millon (putih)           larutan berwarna putih keruh dan ada endapan merah bata

v  Filter albumin (putih keruh) + air                  larutan bening

v  Endapan putih telur (putih) + reagen biuret (biru)                    larutan berwarna ungu muda lama kelamaan berwarna biru dan ada gelatin putih

v  Endapan putih telur (putih) + reagen millon (putih)                    larutan berwarna putih keruh dan ada endapan merah bata

v  Endapan putih telur (putih) + air                larutan putih keruh

v  Filter putih telur (keruh) + reagen biuret (biru)         terdapat 2 lapisan yaitu lapisan atas biru bening dan lapisan bawah berwarna putih lama kelamaan berwarna biru dan ada gelatin putih

v  Filter putih telur (keruh) + reagen millon (putih)         larutan berwarna putih keruh dan ada endapan merah bata

v  Filter putih telur (keruh) + air           larutan bening

v  Endapan kuning telur  (kuning) + reagen biuret (biru)        larutan berwarna ungu

v  Endapan kuning telur  (kuning) + reagen millon (putih)            larutan berwarna merah dan ada endapan merah

v  Endapan kuning telur  (kuning) + air                    larutan kuning

v  Filter kuning telur  (kuning) + reagen biuret (biru)                     terdapat 2 lapisan yaitu atas berwarna ungu dan bawah berwarna kuning

v  Filter kuning telur (kuning) + reagen millon (putih)                       terdapat 2 lapisan yaitu atas berwarna bening dan bawah berwarna kuning dan ada endapan merah

v  Filter kuning telur  (kuning) + air                  larutan kuning keruh

4. Uji Koagulasi

v  Putih telur + asam asetat dipanaskan + air                   endapan putih dan tidak larut

v  Putih telur + asam asetat dipanaskan + milon                    larutan keruh dan endapan merah bata

v  Kuning  telur + asam asetat dipanaskan + air                  larutan berwarna keruh dan  endapan kuning

v  Kuning  telur + asam asetat dipanaskan + milon                    larutan berwarna keruh dan  endapan merah

v  Albumin + asam asetat dipanaskan + air                   larutan tetap bening dan tidak ada endapan

v   Albumin + asam asetat dipanaskan + milon                    larutan tetap bening dan tidak ada endapan

v  Tirosin + asam asetat dipanaskan + air              larutan tetap bening dan tidak ada endapan

v  Tirosin + asam asetat dipanaskan + milon                    larutan tetap bening dan tidak ada endapan  

5. Pengendapan dengan Alkohol

      Tabung pertama berwarna bening

      Tabung kedua berwarna bening

      Tabung ketiga ada endapan putih

6. Denaturasi Protein

v  Albumin + HCl              larutan tetap bening  + buffer    larutan bening dan ada endapan putih

v  Albumin + NaOH                 larutan bening + buffer          larutan putih  keruh dan ada endapan putih

v  Albumin  + buffer               larutan bening dipanaskan         larutan putih keruh dan ada endapan          

7. Uji Sulfur dalam Protein

v  Serbuk albumin (kuning)  + reagen fuxion mixture (putih)         serbuk berwarna kuning muda  dipanaskan                        serbuk kuning kecoklatan + air panas  disaring        larutan kuning coklat dan ada endapan,filtrat kuning bening dipanaskan + HCl             larutan  tetap bening + BaCl₂    larutan putih keruh dan ada endapan putih.

VIII.        Reaksi Kimia

(maaf tidak ditampilkan)

IX.        Pembahasan

Pada percobaan uji protein ini dilakukan berbagai macam uji, yaitu uji buret, pengendapan dengan logam, pengendapan dengan garam, denaturasi protein, uji sullfur dan pengendapan dengan alkohol.

Pada uji biuret dihasilkan warna violet/ungu. Hal ini disebabkan penambahan CuSO₄ sehingga terbentuk kompleks antar Cu²⁺dengan gugus amino dari protein.. makin kuat intensitas warna ungu yang dihasilkan ini menunjukan makin panjang ikatan peptidanya. Dengan perubahan warna ungu yang diperoleh ini menunjukan bahwa uji ini positif terhadap biuret.

Pada uji pengendapan logam dihasilkan endapan berwarna putih dan larutan keruh. Endapan yang terbentuk merupakan endapan yang berasal dari protein yang diuji, endapan ini terjadi karena adanya reaksi logam Pb dengan protein. Logam Pb ini merupakan logam yang mengandung ion positif. Dimana salah satu sifat dari logam yang mengandung ion positif dapan menghasilkan endapan jika direaksikan dengan protein. Sama halnya dengan Hg yang juga merupakan logam yang mengandung ion positif yang juga dapat menghasilkan endapan jika direaksikan dengan protein dasar reaksi pengendapan oleh logam berat adalah penetralan muatan. Dimana pengendapan akan terjadi bila protein berada dalam bentuk isoelektrik yang bermuatan negatif, dengan adanya muatan positif dari logam berat akan terjadi reaksi netralisasi dari protein dan dihasilkan garam protein yang mengendap. Endapan ini akan melarut kembali dengan penambahan alkali yang sifat pengendapan ini adalah reversibel.

Untuk percobaan pada uji pengendapan dengan garam itu hasil yang diperoleh yaitu endapan yang bewarna merah. Endapan ini menunjukkan atau merupakan hasil dari garam-garam organik dalam persentase tinggi yang dapat mempengaruhi sifat kelarutan protein. Pengendapan yang dikarenakan penambahan ammonium sulfat menyebabkan terjadi dehidrasi protein atau sering dikenal dengan kehilangan air, sehingga proses dehidrasi ini molekul protein yang mempunyai kelarutan paling kecil akan mudah mengendap. Hasil pencampuran antara serbuk ammonium sulfat dengan protein menghasilkan endapan dan filtrat, untuk endapan dilakukan uji millon dan menghasilkan larutan dengan endapan merah, hal ini dikarenakan karena pereaksi millon adalah larutan merkuro dan merkuri nitrat dalam asam nitrit. Apabila pereaksi ini ditambahkan pada larutan protein, akan menghasilkan endapan putih yang dapat menjadi merah pada pemanasan. Pada dasarnya reaksi ini positif untuk fenol-fenol dikarenakan terbentuknya senyawa merkuri dengan gugus hidroksifenil yang bewarna, protein yang mengandung tirosin akan memberikan uji positif.

Pada percobaan uji koagulasi ini dimana berdasarkan literatur jika protein ditambahkan dengan larutan asam atau basa, maka akan terdenaturasi atau terjadi penggumpalan. Penggumpalan ini dapat juga terjadi karena pemanasan yang dilakukan, dengan proses pemanasan struktur protein akan menjadi rusak, untuk itulah pada percobaan ini diperoleh endapan, setelah endapan diperoleh ditambahkan dengan reagen millon dan menghasilkan larutan bening dan endapan merah. Hal ini menunjukkan bahwa uji koagulasi menghasilkan positif terhadap uji millon. Pada pemanasan 50 derajat protein sudah mengalami koagulasi. Koagulasi ini terjadi bila larutan protein berada pada titik isoelektriknya. Ion-ion logam berat yang masuk ke dalam tubuh akan bereaksi dengan sebagian protein, sehingga menyebabkan terjadinya koagulasi (penggumpalan).

Sedangkan untuk denaturasi yang merupakan perubahan sifat fisik dari protein, perubahan ini dapat disebabkan oleh beberapa hal diantaranya yaitu perubahan suhu, akibat adanya pemanasan adanya reagen yang digunakan. Dalam percobaan ini hanya tabung tiga yang terdapat endapan ini merupakan protein yang terkoagulasi . akibat adanya pemanasan karena protein sangat peka terhadap lingkungan apalagi adanya perubahan suhu, hal ini menyebabkan larutan menjadi keruh dan adanya gumpalan-gumpalan dari protein yang terdenaturasi. Perubahan kimia yang berhubungan dengan denaturasi protein adalah protein dapat diakibatkan bukan hanya oleh adanya pemanasan, tetapi juga pH, dan juga pelarut organiknya.

Pada percobaan pengendapan dengan alkohol hasil yang diperoleh untuk tabung I dan II tidak terdapat endapan dan larutan berwarna bening, sedangkan tabung III terdapat endapan putih, hal ini menunjukkan bahwa tabung III positif terhadap uji ini. Dimana masing-masing mendapatkan perlakuan yang berbeda-beda, untuk tabung 1 protein yang ditambahakan HCl menghasilkan protein yang larut dalam air, begitu juga dengan tabung II yaitu dengan penambahan NaOH. Sedangkan untuk tabung III protein yang terdapat dalam tabung tersebut tidak dapat larut, hal ini dikarenakan penambahan larutan buffer asetat berfungsi untuk permunian protein, sehingga protein yang terdapat dalam tabung III dapat larut.

Pada percobaan uji sulfur serbuk albumin ditambahkan dengan frussion mixture dan dipanaskan lalu ditambahkan air mendidih didapatkan endapan berwarna kuning dan filtrat berwarna bening. Setelah itu filtrat diasamkan dengan HCl dan ditambahkan BaCl₂ dan terbentuk larutan yang keruh.

X. Kesimpulan

1. Makin kuat intensitas warna ungu yang dihasilkan pada uji biuret ini menunjukan makin panjang ikatran peptidanya.
2. Koagulasi dapat terjadi bila larutan protein berada pada titik isoelektriknya. Ion-ion logam berat yang masuk ke dalam tubuh akan bereaksi dengan sebagian protein, sehingga menyebabkan terjadinya koagulasi (penggumpalan).
3. Dalam uji denaturasi protein, tabung 1,tabung 2 dan tabung 3 terdapat endapan, ini merupakan protein yang terkoagulasi, akibat adanya pemanasan karena protein sangat peka terhadap lingkungan apalagi adanya perubahan suhu, hal ini menyebabkan larutan menjadi keruh dan adanya gumpalan-gumpalan dari protein yang terdenaturasi.
4. Endapan yang bewarna merah pada uji pengendapan garam merupakan hasil dari garam-garam organik dalam persentase tinggi yang dapat mempengaruhi sifat kelarutan protein.
5. Pada uji pengendapan logam, endapan yang dihasilkan bewarna putih dan larutan yang keruh, endapan yang dihasilkan tersebut berasal dari protein yang diuji, endapan ini terjadi karena adanya reaksi logam Pb dengan protein.
6. Pada percobaan uji sulfur,endapan yang dihasilkan berwarna kuning dan filtrat berwarna kuning.Setelah diasamkan dengan HCl dan ditambahkan BaCl₂ terbentuk larutan yang keruh.
7. Pada percobaan pengendapan dengan alkohol hasil yang diperoleh untuk tabung I dan II tidak terdapat endapan dan larutan berwarna bening, sedangkan tabung III terdapat endapan putih, hal ini menunjukkan bahwa tabung III positif terhadap uji ini.

XI. Daftar Pustaka

- Lehninger.1982. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta : Erlangga.

- Pudjiadi, Anna.1994. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta : UI.

- Arbianto, Purwo.1993. Biokimia Konsep-Konsep Dasar. Bandung : ITB.

          

 *Jawaban Pertanyaan

      Uji buret

      a. warna apa yang terjadi ?

      jawab   : warna yang dihasilkan adalah ungu

      b. mengapa harus dihindarkan kelebihan CuSO₄ ?

      jawab   : karena jika CuSO4 kelebihan akan menyebabkan terbentuknya garam ammonium

      c. mengapa garam ammonium mengganggu ?

      jawab   : karena dapat mengganggu pada saat pengamatan.

      d. sebutkan dua macam zat lain selain protein yang memberikan uji biuret positif?

      jawab   : Histidin, serin, threonin, merupakan zat lain selain protein yang memberikan uji biuret positif.

      Pengendapan dengan logam

      a. apa hasilnya ?

      jawab   : menghasilkan endapan putih

      b. terangkan mengapa putih telur digunakan sebagai antidote pada keracunan Pb dan Hg ?

      jawab : Putih telur digunakan sebagai antidote pada keracunan Pb dan Hg karena putih telur dapat mengikat Pb dan Hg sehingga Pb dan Hg bereaksi dan mengendap dan tidak menimbulkan keracunan.

      uji koagulasi

      a. mengapa ditambahkan asam ?

      jawab   : ditambahkan asam untuk menggumpalkan protein

      b. protein apa yang mendidih pada pendidihan ?

      jawab   : protein yang menggumpal pada pendidihan adalah semua protein selain gelatin.

      uji pengendapan dengan pada alkohol

      a. apakah kelarutan albumin dalam air terjaci pada titik isoelektriknya ?

      jawab   : ya, kelarutan albumin dalam air terjadi pada titik isoelektriknya.

      uji denaturasi

      a. sifat fisik apakah dari protein yang mempengaruhi kelarutan protein dalam percobaan ?

      jawab   : sifatnya sangat peka terhadap lingkungan, apabila konfirmasi molekul protein berubah, misalnya oleh perubahan suhu, pH atau karena terjadinya suatu reaksi dengan senyawa lain, maka keaktifan biokimianya berkurang.

      b. metopde lain yang dapat digunakan pada denaturasi protein ?

      jawab   : yaitu metode pemanasan, metode kromatografi dan metode pemurnian enzim.

      c. perubahan apa yang berhubungan dengan denaturasi protein?

      Jawab  : perubahan suhu, pH, dan pelarut organik.

      pengendapan dengan garam

      Terangkan hasil-hasilnya ?

      Jawab  : pada percobaan ini hasil yang didapatkan adalah endapan dan filtrat yang dimana endapannya diuji dengan milon dan dipanaskan menghasilkan warna merah bata dan filtratnya diuji dengan biuret yang menghasilkan warna ungu.

      uji sulfur

      a. mengapa protein memberikan uji positif pada sulfur?

      Jawab  : karena protein dengan sulfur menghasilkan endapan PbS yang berasal dari Pb asetat dan sulfur sehingga protein memberikan uji positif terhadap uji sulfur.

      b. unsur-unsur apa yang bisa dalam protein tetapi tidak ada dalam lipid dan karbohidrat?

      Jawab  : unsur P (phosphor), nitrogen, dan sulfur.